賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問(wèn)題

軟件問(wèn)題

提示后密封清洗液用完，添加后密封清洗液后仍然報錯

重新啟動(dòng)蠕動(dòng)泵：進(jìn)入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active，點(diǎn)擊enter即可

柱溫箱溫度已達到規定范圍，但仍顯示未就緒

柱溫箱的平衡時(shí)間設置過(guò)長(cháng)，可在儀器方法中修改

如何查看紫外燈能量

VWD：打開(kāi)UV界面的“Wellness"選項即可查看燈壽命和使用時(shí)間；DAD：打開(kāi)UV界面的“Wellness"選項可查看燈的使用時(shí)間，在Startup界面可查看燈能量

如何設置序列或者進(jìn)樣完成后自動(dòng)打印/導出報告

在Queue界面的“Report setup"項下進(jìn)行設置

峰面積較小的色譜峰無(wú)法自動(dòng)積分

在Cobra向導中設置合適的基線(xiàn)噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積

如何去掉報告中的變色龍水印

打開(kāi)管理控制臺——全局策略——水印，將“打印水印"的勾去掉即可

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無(wú)法自動(dòng)識別樣品盤(pán)類(lèi)型

1）齒輪松動(dòng)，聯(lián)系工程師；2）樣品盤(pán)上的二維碼損壞或有液滴；3）正確放置樣品盤(pán)，使A1號位在左后方

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無(wú)法正常進(jìn)樣

重新關(guān)好自動(dòng)進(jìn)樣器的門(mén)

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器是否需要校正針位

不需要

壓力升高

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機相種類(lèi)等發(fā)生變化）

比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力升高，再按照下述原因進(jìn)行排查

保護柱的柱芯污染

更換新的柱芯

進(jìn)樣閥load狀態(tài)壓力正常，切至inject狀態(tài)時(shí)壓力升高，可能是六通閥或進(jìn)樣針堵塞

超聲進(jìn)樣針/六通閥的定子和轉子，若無(wú)效則更換

靜態(tài)混合器堵塞

反沖靜態(tài)混合器，無(wú)效則更換。平常操作時(shí)：流動(dòng)相的純度需要滿(mǎn)足分析檢測的要求、檢測泵內密封圈的密封性

針座密封堵塞

對針座密封超聲清洗

色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞

反沖流通池（注意壓力：DAD/VWD耐壓120bar；FLD耐壓20bar），無(wú)效則聯(lián)系工程師

壓力傳感線(xiàn)接觸不良

重新拔插壓力傳感線(xiàn)。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線(xiàn)接頭

新色譜柱壓力逐漸升高

新色譜柱的填料在流動(dòng)相作用下逐漸壓實(shí)，柱壓會(huì )逐漸升高，但使用一段時(shí)間后，相同條件下壓力會(huì )趨于穩定

色譜柱污染

按照色譜柱說(shuō)明書(shū)進(jìn)行沖洗和在生，無(wú)效則更換

CAD的噴針堵塞

取出噴針進(jìn)行超聲清洗（注意針尖不要和瓶底接觸）。建議檢測器入口安裝不銹鋼過(guò)濾器，阻止柱填料流失

排氣泡時(shí)未擰松purge閥

排氣泡前逆時(shí)針擰松1.5~2圈

柱前預熱或者柱后冷卻器堵塞

反沖，需要時(shí)更換

壓力ZUI高限設置不合適引起壓力超限

根據色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設置合適的限值

樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞

先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時(shí)：若流動(dòng)相含有緩沖鹽，建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動(dòng)相平衡；為避免樣品在流動(dòng)相中析出，建議采用初始流動(dòng)相溶解樣品

壓力降低

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機相種類(lèi)等發(fā)生變化）

比較相同條件下壓力的變化趨勢，若壓力降低，再按照下述原因進(jìn)行排查

管路沒(méi)有擰緊導致溶液泄露

重新擰緊泄露處的管路

流動(dòng)相走空

加入流動(dòng)相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設置合適的壓力低限

系統流路中含有大量氣泡

重新對流動(dòng)相排氣泡，待基線(xiàn)和壓力穩定后再進(jìn)樣

過(guò)濾頭堵塞：某通道溶液無(wú)法抽出，取下過(guò)濾頭后恢復正常

超聲清洗過(guò)濾頭，無(wú)效則更換

單向閥堵塞：所有通道的溶液均無(wú)法抽出

超聲清洗單向閥，無(wú)效則更換

脫氣機管路堵塞：某通道溶液無(wú)法抽出，短接脫氣機后恢復正常

沖洗脫氣機管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機管路，尤其水相通道

比例閥損壞：某通道溶液無(wú)法正常抽出，更換比例閥接口后恢復正常

聯(lián)系工程師

針座密封發(fā)生漏液

更換針座密封

排氣后忘記關(guān)閉Purge閥

流動(dòng)相排完氣泡后及時(shí)擰緊purge閥，但不需要擰得過(guò)緊

purge閥密封性變差

更換新的purge閥

壓力傳感線(xiàn)接觸不良

重新拔插壓力傳感線(xiàn)。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線(xiàn)接頭

進(jìn)樣時(shí)吸入空氣

1）設置合適的進(jìn)樣高度；2）樣品量太少時(shí)可加襯管

進(jìn)樣瞬間壓力下降，后又恢復正常

U3000：正?，F象，吸入的樣品溶液沒(méi)有經(jīng)過(guò)預壓縮，為常壓狀態(tài)，高壓的流動(dòng)相與常壓樣品接觸時(shí)會(huì )引起壓力下降；Vanquish：不會(huì )出現該情況

轉子發(fā)生磨損，導致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

更換轉子

單向閥裝反

重裝單向閥

壓力波動(dòng)

流動(dòng)相含有氣泡（一般呈規律的鋸齒狀波動(dòng)）

重新對流動(dòng)相排氣泡，待基線(xiàn)和壓力穩定后再進(jìn)樣

過(guò)濾頭部分堵塞；流動(dòng)相瓶及低壓區輸液管路被菌類(lèi)或藻類(lèi)污染

超聲清洗過(guò)濾頭和流動(dòng)相瓶，沖洗低壓區輸液管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機管路，尤其水相通道

單向閥部分堵塞

超聲清洗單向閥，無(wú)效則更換。平常操作時(shí)：建議儀器不要長(cháng)期保存在純乙腈中；若流動(dòng)相中緩沖鹽濃度過(guò)高可增加泵前溶液的混合體積

輸液泵的密封圈發(fā)生泄漏

更換輸液泵的柱塞桿或密封圈

流動(dòng)相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動(dòng)相提前混合

進(jìn)樣后壓力不穩定，且保留時(shí)間重現性不佳

在儀器方法的自動(dòng)進(jìn)樣器界面設置與泵同步

脫氣盒損壞

聯(lián)系工程師。平常操作時(shí)，建議：1）所有流動(dòng)相的過(guò)濾頭均置于液面以下，減少真空泵的工作負荷；2）使用正相溶劑時(shí)短接脫氣機

比例閥損壞

聯(lián)系工程師

計量泵裝置密封圈發(fā)生泄漏

更換計量泵的柱塞桿或密封圈

保留時(shí)間前移

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機相種類(lèi)等發(fā)生變化）

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢，若前移，再按照以下原因進(jìn)行排查

流動(dòng)相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動(dòng)相提前混合

色譜柱未充分平衡

延長(cháng)系統的平衡時(shí)間，尤其當流動(dòng)相中含有離子對試劑時(shí)

色譜柱污染

表面活性劑污染時(shí)該現象尤為明顯，根據色譜柱的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行沖洗，需要時(shí)更換色譜柱

固定相塌陷

更換色譜柱。平常操作時(shí)：在色譜柱規定范圍內進(jìn)行使用

緩沖鹽吸潮導致配置的濃度過(guò)低

將易潮解的鹽置于干燥器中保存

保留時(shí)間后移

色譜條件發(fā)生改變（如柱溫、流速、有機相種類(lèi)等發(fā)生變化）

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢，若后移，再按照以下原因進(jìn)行排查

流動(dòng)相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動(dòng)相提前混合

轉子發(fā)生磨損，導致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

更換轉子

色譜柱未充分平衡

延長(cháng)系統的平衡時(shí)間，尤其當流動(dòng)相中含有離子對試劑時(shí)

系統流路含有氣泡

重新對流動(dòng)相排氣泡，待基線(xiàn)和壓力穩定后再進(jìn)樣

流動(dòng)相組成發(fā)生變化

對于提前混合好的流動(dòng)相，注意置于陰涼處密封保存

比例閥故障

聯(lián)系工程師

柱外死體積增加

更換內徑更小、更短的管路進(jìn)行連接

保留時(shí)間不穩定

單向閥堵塞

超聲清洗單向閥，無(wú)效則更換

平衡時(shí)間不足

延長(cháng)系統的平衡時(shí)間，尤其當流動(dòng)相中含有離子對試劑時(shí)

流動(dòng)相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動(dòng)相提前混合

比例閥故障

聯(lián)系工程師

未設置柱溫

在儀器方法中設置合適的柱溫

系統流路含有氣泡

重新對流動(dòng)相排氣泡，待基線(xiàn)和壓力穩定后再進(jìn)樣

前延峰

分離不佳，大峰前部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件

柱頭前端過(guò)濾篩板部分堵塞

更換色譜柱或低流速反沖色譜柱

色譜柱塌陷

更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應用條件（壓力或pH值范圍）

溶劑效應

1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強度；3）調換進(jìn)樣閥接口（U3000：調換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調換進(jìn)樣閥1、2號位）

色譜柱過(guò)載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內徑色譜柱）

拖尾峰

分離不佳，大峰后部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件（緩沖鹽的濃度、流動(dòng)相的pH值、洗脫條件等）

樣品與硅烷官能團反應（常規C18柱分析堿性化合物）

建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑

柱外體積過(guò)大

進(jìn)樣器和色譜柱間使用更短、更細的管路連接

色譜柱過(guò)載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量（選用更大內徑色譜柱）

色譜柱柱效下降

更換色譜柱或保護柱

檢測器響應時(shí)間過(guò)長(cháng)

使用推薦值

分叉峰或雙峰

分離不佳

改進(jìn)色譜條件

保護柱或色譜柱污染

1）更換保護柱；2）清洗或更換分析柱

柱頭死體積過(guò)大

更換合適的管路接頭或更換色譜柱（色譜柱前端塌陷）

溶劑效應

1）降低進(jìn)樣量；2）降低樣品溶解液洗脫強度；3）調換進(jìn)樣閥接口（U3000：調換進(jìn)樣閥4、5號位；Vanquish：調換進(jìn)樣閥1、2號位）

色譜柱溫度影響

一般發(fā)生在色譜柱內徑大于3 mm，并且溫度條件很高的情況下。選用預加熱來(lái)確保色譜柱中流動(dòng)相溫度不會(huì )梯度變化

儀器轉子密封磨損

更換轉子密封

鬼峰

上一針樣品未全都洗脫

延長(cháng)分析時(shí)間或改用梯度洗脫

進(jìn)樣器交叉污染

1）增加洗針程序；2）清洗或更換易污染部件，如針、針座密封

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗

流動(dòng)相、色譜柱或流通池污染

逐一排查原因，采取相應措施，如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速沖洗，特別注意水相流動(dòng)相的污染

流通池有氣泡

排除氣泡

不出峰

未進(jìn)樣，或進(jìn)樣量不足

1）保證樣品瓶中樣品量足夠；2）檢查進(jìn)樣類(lèi)型是否為“Blank"

過(guò)高的背景電流/噪音（CAD）

選擇純度較高的流動(dòng)相

樣品容易揮發(fā)（CAD）

查看分析物的蒸氣壓

色譜柱柱效下降

按照說(shuō)明書(shū)對色譜柱進(jìn)行在生，無(wú)效則更換色譜柱

負峰

不合適的參比波長(cháng)（DAD）或RI檢測器參比池未充分沖洗 

DAD：設置合適的參比波長(cháng)或不使用該功能；RI：增加平衡時(shí)間

樣品溶解液與流動(dòng)相差別太大

使用流動(dòng)相溶解樣品

洗脫物比流動(dòng)相吸收值低

更換波長(cháng)或使用低吸收溶劑做流動(dòng)相

錯誤的信號輸出極性

檢查信號輸出極性，請打400電話(huà)

廢液引起（CAD） 

確保PEEK管在廢液瓶中

數據處理時(shí)設置了色譜圖扣除命令

不使用色譜圖扣除的功能

RI檢測器未關(guān)閉參比池通道（樣品連續流過(guò)樣品池和參比池）

關(guān)閉參比池通道

霧化針污染（CAD）

異丙醇超聲清洗霧化針，無(wú)效則更換

毛刺峰

流通池進(jìn)氣泡

流通池出口增加長(cháng)度的背壓管，但不能超過(guò)流通池的耐壓范圍（注意：FLD流通池耐壓＜20bar，不能增加被壓管）

電壓不穩或儀器接地不正確

常見(jiàn)于CAD/ECD，打400電話(huà)

CAD檢測器被污染

以50%甲醇沖洗，無(wú)改進(jìn)打400電話(huà)

峰面積減小

進(jìn)樣器堵塞

逐段排查阻塞點(diǎn)，需要時(shí)請打400電話(huà)

檢測器燈能量偏低

更換新燈

檢測波長(cháng)設置不合理

設置合理的檢測波長(cháng)

待測物降解

使用合適的保存條件，如使用含溫控單元的自動(dòng)進(jìn)樣器

CAD霧化溫度過(guò)高，半揮發(fā)成份流失

降低霧化溫度

儀器有漏液

檢查漏液位置

峰面積重現性差

自動(dòng)進(jìn)樣器轉子密封/針座密封發(fā)生磨損

更換新的轉子密封/針座密封，需要時(shí)請打400電話(huà)

進(jìn)樣針的針尖彎曲或堵塞

超聲清洗進(jìn)樣針（注意針尖不要接觸瓶底），無(wú)效則更換

進(jìn)樣前針位未處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣前，保證針位處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣器的注射器進(jìn)氣泡

進(jìn)樣前執行灌注注射器命令排除注射器內氣泡，需要時(shí)需手動(dòng)排氣泡

自動(dòng)進(jìn)樣器抽樣速度過(guò)快

降低進(jìn)樣針的抽樣速度，使抽樣時(shí)間至少3-5秒

自動(dòng)進(jìn)樣器的注射器密封不嚴/注射器三通閥磨損

更換新的注射器/注射器三通閥，需要時(shí)請打400電話(huà)

基線(xiàn)周期性波動(dòng)

泵壓力波動(dòng)

采集壓力通道的信號，尋找壓力波動(dòng)的原因

管路或流通池中有氣泡

流動(dòng)相充分脫氣

基線(xiàn)無(wú)規律波動(dòng)

溫度波動(dòng)

控制好溫度，使用對溫度較敏感的RI檢測器時(shí)要尤為注意

流動(dòng)相混合不均勻

1）更換更大的靜態(tài)混合器；2）若為等度分析，可將流動(dòng)相提前混合

檢測器燈能量過(guò)低

更換新燈

流通池被污染

用不同極性溶劑沖洗流通池

流動(dòng)相或色譜柱被污染

更換流動(dòng)相或色譜柱

電壓不穩或儀器接地不正確

常見(jiàn)于CAD/ECD，請打400電話(huà)

紫外檢測器波長(cháng)低于溶劑截止波長(cháng)

1）選擇合適的流動(dòng)相進(jìn)行分析；2）改變檢測波長(cháng)

其他

蠕動(dòng)泵抽不出溶液

1）彎頭注射器抽出管路氣泡；2）清理擠壓部位；3）更換新的軟管

提示密封圈泄露超限

1）更換密封圈和/或柱塞桿；2）向右擠壓蠕動(dòng)泵杠桿

Vanquish更換流通池時(shí)的注意事項

先關(guān)掉檢測器模塊的總電源再進(jìn)行更換